制備柱是氣液相的關(guān)鍵部件，主要由兩大類組成，毛細(xì)管柱和填充柱，其中毛細(xì)管柱由兩部分組成：管線和固定相，管線主要有熔融石英和不銹鋼兩種。固定相是色譜分離的關(guān)鍵，它有很多種，大多數(shù)是高分子量、熱穩(wěn)定性好的聚合物，這些聚合物是液體或膠，常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇，還有另外常用的固定相是小的多孔顆粒，由聚合物和沸石組成，在色譜實驗過程中選擇合適的產(chǎn)品對實驗的順利開展和實驗結(jié)果的性而言是十分重要的。

 

　　今天咱們來聊一聊制備柱的選擇方法：

 

　　1、填料基質(zhì)

 

　?。?）硅膠基質(zhì)：純度高本錢低，強度大，化學(xué)修飾輕易，但pH值范圍有限。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定，但經(jīng)過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。

 

　?。?）聚合物基質(zhì)：應(yīng)用pH值范圍寬，溫度穩(wěn)定(高溫可以達到80度以上)，機械強度小。

 

　　2、顆粒外形

 

　　大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒，但有時是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。

 

　　3、顆粒粒徑

 

　　粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時會導(dǎo)致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品，UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。

 

　　4、含碳量

 

　　含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進步柱容量、分辨率及分析時間，用于要求高分離度的復(fù)雜樣品;低含碳量分析時間短、展現(xiàn)不同的選擇性，用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。