一文與您分享液相色譜C18預(yù)柱的操作方法
瀏覽次數(shù):523發(fā)布日期:2023-03-10
液相色譜C18預(yù)柱是一種重要的色譜柱,主要用于樣品預(yù)處理和前處理。液相色譜C18預(yù)柱是以C18為主要填料材料的柱體,其原理是利用C18固定相對樣品進行分離。C18固定相具有親水性和疏水性,可根據(jù)樣品的親水性和疏水性進行選擇性分離。C18固定相的表面活性基團是十八烷基,它能夠與樣品中的疏水基團發(fā)生疏水相互作用,從而實現(xiàn)疏水性分離。
下面介紹液相色譜C18預(yù)柱的操作方法。
1.樣品制備
首先需要準(zhǔn)備好待測樣品。樣品可以是生物、環(huán)境或食品樣品等。樣品制備時要注意樣品的穩(wěn)定性和溶解度,盡可能將樣品溶解于合適的溶劑中。
2.處理
首先將該產(chǎn)品放入色譜儀中,并用流動相(純水或有機溶劑)進行凈化,去除殘留物。
3.樣品的進樣
使用微量注射器將樣品注入預(yù)柱,并調(diào)整流速和流量以使樣品進入柱。樣品進入柱后,可以加入更多流動相以保證樣品均勻分布在柱中。
4.流動相的處理
接下來,需要將流動相逐漸轉(zhuǎn)換為含有酸、堿或緩沖液的溶液。這樣可以幫助保持柱的穩(wěn)定性并避免樣品集中在某些局部影響分離效果。
5.柱洗滌和后處理
處理結(jié)束后,需要用純?nèi)軇┣逑粗?。可以使用等體積的乙腈和水進行清洗,使柱內(nèi)的殘留物清除干凈。
6.柱存儲
后需要將預(yù)柱用純?nèi)軇┻M行洗滌,然后將其放入存儲液中存放。存儲液可以是酒精、乙腈或水,長期儲存可以冷藏或放置在陰涼處。
總之,液相色譜C18預(yù)柱是一種重要的色譜柱,能夠有效地前處理樣品并獲得高質(zhì)量的分離效果。操作時需要注意處理流程和注意維護柱的穩(wěn)定性。